หน้าร้านดีดี บอร์ด

เกษตร Zone => การเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ => ข้อความที่เริ่มโดย: jacky ที่ เมษายน 04, 2010, 10:32:19 PM



หัวข้อ: 9.อุปกรณ์ที่ใช้ในการฟอกฆ่าเชื้อ
เริ่มหัวข้อโดย: jacky ที่ เมษายน 04, 2010, 10:32:19 PM
อุปกรณ์ที่ใช้ในการฟอกฆ่าเชื้อ


อุปกรณ์ที่ใช้ในการฟอกฆ่าเชื้อ

1. คลอรอกซ์
  2. น้ำกลั่นที่ผ่านการนึ่งฆ่าเชื้อสำหรับล้างชิ้นส่วนพืช
  3. บีกเกอร์ใส่ชิ้นส่วนพืช
  4. สารจับใบ Tween 20

วิธีเตรียมน้ำยาฟอกฆ่าเชื้อ
 
          ในการเตรียมหรือผสมสารละลายให้เกิดความเข้มข้นที่มีหน่วยเป็นเปอร์เซ็นต์ จะสามารถปฏิบัติได้สะดวกที่สุด เพราะคิดเทียบจาก 100 เช่น ถ้าจะเตรียมสารละลายคลอรอกซ์ 10% แสดงว่าในสารสะลาย 100 มล.  จะประกอบด้วยคลอรอกซ์ ประมาณ 10 มล. ผสมกับน้ำ 90 มล.
แสดงวิธีเตรียมสารละลายที่ใช้เป็นประจำในการปฏิบัติงานตั้งแต่เอทิลแอลกอฮอล์ 70%  คลอรอกซ์ที่ระดับความเข้มข้น 20% และ 10% เป็นต้น

  1. คลอรอกซ์ 20% มีขั้นตอนการเตรียม ดังนี้
  1.1 ตวงคลอรอกซ์ ปริมาณ 20 มล.
  1.2 ตวงน้ำกลั่นที่นึ่งฆ่าเชื้อแล้ว ปริมาณ 80 มล.
  1.3 รินคลอรอกซ์ลงในน้ำกลั่นจนหมด
  1.4 เติมสารจับใบลงไป 1 - 2 หยด

  2. คลอรอกซ์ 10% มีขั้นตอนการเตรียม ดังนี้
  2.1 ตวงคลอรอกซ์ ปริมาณ 10 มล.
  2.2 ตวงน้ำกลั่นที่นึ่งฆ่าเชื้อแล้ว ปริมาณ 90 มล.
  2.3 รินคลอรอกซ์ลงในน้ำกลั่นจนหมด
  2.4 เติมสารจับใบลงไป 1 - 2 หยด

ข้อควรระวัง  
เมื่อเตรียมคลอรอกซ์แล้วควรใช้ทันทีไม่ควรเก็บไว้เพราะจะทำให้ประสิทธิภาพในการฟอกฆ่าเชื้อลดลง

    
วิธีฟอกฆ่าเชื้อจุลินทรีย์
 
      ตัวอย่างการฟอกฆ่าเชื้อชิ้นส่วนพืชด้วยคลอรอกซ์เข้มข้น 20% ใช้เวลา 20 นาที มีลำดับขั้นตอนปฏิบัติดังนี้
  1. ทำความสะอาดชิ้นพืชด้วยน้ำสะอาด เช่น น้ำไหลจากก๊อกที่เปิดไม่แรงจนเกินไป     เพื่อชะล้างสิ่งสกปรกที่ติดมากับชิ้นส่วนพืชนั้น ๆ
  2. ตัดแต่งชิ้นพืชให้เหลือไว้เฉพาะส่วนที่ต้องการด้วยการตัดใบทิ้งหรือตัดเป็นท่อนขนาดประมาณ3 -5 ซม. เพื่อความสะดวกในการทำงานในขั้นตอนต่อไป
  3. นำชิ้นพืชแช่ในสารละลายคลอรอกซ์ที่มีความเข้มข้น 20% เป็นเวลา 20 นาที อาจผสมสารจับใบ(Tween-20) หรือน้ำยาล้างจาน 2 - 3 หยด    เพื่อช่วยลดแรงตึกผิว
 และทำให้สารละลายคลอรอกซ์เข้าทำลายเชื้อที่ติดอยู่ตามผิวพืชได้มากขึ้น    
  4. นำมาล้างด้วยน้ำกลั่นที่นึ่งฆ่าเชื้อแล้ว 3 ครั้ง ๆ ละ 3 - 5 นาที เพื่อล้างเอาสารเคมีออกให้หมด  มิฉะนั้นสารเคมีที่ติดค้างอยู่อาจจะยับยั้งการเจริญของเซลล์พืชได้
  5. ตัดแต่งชิ้นพืชส่วนที่ถูกสารเคมีทำลาย  (สังเกตจากสีจะซีดกว่าปกติ)  ตัดแต่ละชิ้นให้มีขนาด 2 -3 ซม. วางเลี้ยงบนอาหารวุ้นในห้องเลี้ยงเนื้อเยื่อ ที่ควบคุมอุณหภูมิประมาณ 250 ซ. และแสง(แสงจากฟลอดไฟฟลูออ-เรสเซนต์) ที่มีการเปิด- ปิดไฟเป็นเวลา 16 - 8 ชั่วโมงต่อวัน

ข้อควรระวัง  
ในขวดอาหารควรใส่ชิ้นพืชเพียง 1 ชิ้นต่อขวดเพื่อเป็นการลดความเสี่ยงต่อความเสียหาย
                         ที่อาจเกิดจากการปนเปื้อนของเชื้อจุลินทรีย์ทั้งหมด



************************************************